快三大赢家

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                科技服务 > 功能机制研究服务 > 双荧光素酶报告基因85折促销

                双荧光素酶报告基因85折促销

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                地区:上海
                简介:提供报告基因载体构建,转染,荧光检测服务
                提供商:上海英拜●生物科技有限公司
                服务名称:双荧光素酶报告基因

                英拜公司双荧光素酶报告基因实验系统采用荧火虫荧光素ξ 酶和海肾荧↘光素酶组成双荧光素酶报告基因实验系统。
                    实验中,一个报告基因(荧火虫荧光素酶)活力的改变,与基因表达的特定实验条件◥相关,而第二个报ㄨ告基因(海肾荧光素酶)的组成性活力提▓供了内对照,使实验值可以规一化。我们在单管中测试两个荧光素酶报告基因,此两个荧光素酶报告基因具有兼容的化学特性、操作条件、速度、灵敏度、线性〗范围和对仪器参数的要求。荧火虫荧光素酶和海肾荧光素酶测试的组合,提供了双遗传报告基因应用的理想测试系统。我们选用的使萤火虫和海肾╱荧光素酶具有最适测试的灵敏度和稳定性。

                可检测的内容:
                1、启动子活性和转录因子结合位点分析实验
                2、microRNA靶基因验证实验
                3、microRNA-circRNA(lncRNA)靶基因验证实验

                ■双荧光素酶报︻告基因系统的组成

                1.荧光素酶¤报告基因载体

                ①萤〓火虫荧光素酶报告基因载体 pGL3 Luciferase Reporter Vector 具□ 有萤火虫荧光素酶报告基因,但该报告基因不含启动子,不∏能表达萤火虫荧光素酶。在该报告基因前导入外来启动子,相应转录因子与外来启动子结合,影响荧光素酶报告基因的表达。我们首先根据需要检测的转录因子(TF,transcription factor),选择与『之对应的promotor/TRE(transcription response element),并将这个promotor/TRE的启动序列克隆到载体上(位置与报告基因相邻),然后将载〓体质粒转入细胞,如果细胞内TF具有活性,TF与promotor/TRE结合,荧光素酶报告基因得到表达,荧光强卐度发生变化;反之,如果细胞内相应的TF没有活性,荧光素酶报告基因在细胞内不◇表达。我们利用灵敏的Bethord 公司的Lumat LB9507荧光检测仪来检测细胞内报告基因的荧光强度,从而对转Ψ 录因子进行活性分析。

                 

                 

                ②海肾荧光素酶报告基因载体phRL-SV40 Vector 具有海肾荧光素Ψ 酶报告基因,该报告基因含SV40的启动子及增强子,能高水平表达海肾荧光素酶基因。可作为检测转染频率的内对照,使实验值可以规一化。

                 

                 

                2.荧光素酶检测系统

                荧光素酶检测系统 Dual-Luciferase?Reporter 1,000 Assay System 借助这一系→统,可以对实验进行精确的分析。

                荧光素酶检测仪器 Lumat LB9507荧光检测仪 提供在一般实验中最好的灵敏度及应用性。软件内建DLReady双报导基︽因检测程序,最适合于报导基因检测的仪器。
                ◆超灵敏侦测仪,检¤测极限可达10-18mole ATP
                ◆双管式侦测室设计,提高一倍的实验效率
                ◆专利喷射式分注器◣,准确加样的同时达到混合样品的作用

                 

                ■双荧光素酶报告基因系统的实验步骤

                1.构建含promotor/TRE序列的萤火虫荧光素酶报告基因载体;

                2.检测阳性菌落,测序;

                3.提取纯化不含内毒素的重组萤火虫荧光素酶报告基因载体;

                4.用构建好的质粒转染宿主细胞,使用双荧光素酶报告基因检测系统,利用灵敏的Bethord 公司的Lumat LB9507荧光检测仪来检测细胞内报告基因的荧光强度,从而对转录因子进行活性⌒分析;在我们的检测系统中,两种荧光素酶可在单个样品中连续测量,连续两次的检测可在4秒钟时间◤内完成,我们检测的线性范围均在10-18摩尔的灵敏度范围以内

                资料下载: circRNA(lncRNA)-microRNA靶基因验证实验.pdf 附件下载  microRNA靶基因验证实验.pdf 附件下载  启动子活性和转录因子结合位点分析实验.pdf 附件下载

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