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                科技服务 > 功能机制研究服务 > Transwell检测细胞迁移

                Transwell检测细胞迁移

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                在现在的科研研究中,最初的研究基本上就是高通量筛选对照组和实验组的差异表达基因,然后进行大样本的荧光定量PCR验证,确定差异基因与某种疾病的相关性。在之后的↑研究中,我们就要针对差异】基因进行干扰或过表达来进行细胞功能实验。其中通过Transwell进行细」胞迁移的检测是比较重要的方法。
                一、服务介绍

                细胞迁移是指细胞在接收到迁移信号或感受到某些物质的梯度△后而产生的移动。细胞迁移为细胞头部伪足的延伸、新的黏附建△立、细胞体尾部收缩在时空上的交替过程。细胞迁移是正常细胞的基本功能之一,是机体正常生长发育的生理过程,也是活细胞普遍存在的一种运动形式。胚胎发育、血管生成、伤口愈合、免疫反应、炎症反应、动脉粥样硬化、癌症转移等过程中都涉及细胞迁移。检测细胞迁移能力的实验包括划痕实验和Transwell实验。

                二、实验原理

                细胞划痕实验是简捷测定细胞迁移√运动与修复能力的方法,在体外培养皿或平板培养的单层贴壁细胞上,用微量枪头或其它硬物在细胞生长的中№央区域划线,去除中央部分的细胞,然后继续培〗养细胞至实验设定的时间是一种ξ简单易行的检测细胞运动的方法,实验成本低,可以用来】检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力。Transwell的基本◆原理是将transwell小室放入培养板中,小室内称为上〗室,培养板内称︽为下室,上下层培养液以◤聚碳酸酯膜相隔,上室内添加上层培养液,下室内◣添加下层培养液。将细胞种在上室内,由于膜有通透╲性,下层培养液中的成分可以影响到上室内的细←胞,从而可以研究下层培养液中→的成分对细胞生●长、运动等的影响。

                三、实验流程

                划痕实验

                1. 用marker笔在6孔板背后¤均匀得划横线;

                2. 在孔中加入细胞;

                3. 第二天用枪头垂至于背后的横线划痕;

                4. 用PBS洗♀去处划下的细胞,培养不同时间◥,取样,拍照;

                5. 数据处理:每『个时间点细胞整体迁移距离=每个时间点距离长度-0时距离;

                6. 结果统计∮分析。

                Transwell实验

                1. 采用未铺 Matrigel 胶的 Transwell 小室用于实验;

                2. 制备∞细胞悬液;

                3. 接种细胞;

                4. 检测穿过①的细胞数;

                5. 结果【统计分析。

                四、客户提供

                细胞株(冻存株或培养好的细胞),所需药品,药物处理方式和浓⊙度。

                五、公司提供

                基本实验步骤、图片、数据分析结果、剩余药品。

                实验周期:大约2-3周左右,具体需要根据细胞生长情况及实验内容而定。


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