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                科技服务 > 功能机制研究服务 > 划痕实验检测细胞侵袭、迁移

                划痕实验检测细胞侵袭、迁移

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                在现在的科研研究中,最初的研究基本上就是高通量筛选对照组和实验组的差异表达基因,然后进行大样本的荧光定量PCR验证,确定差异基因与某种疾病的相关性。在之后的研究中,我们就要针对差异基因进行干扰或过表达来进行细胞功能实验。其中通过T划痕实验进行细胞侵袭、迁移的检测是比较重要的方法。


                细胞划痕是一种简单易行的检测细胞运动的方法,实验成本低,可以用来检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力。

                细胞划痕∑内容:

                材料:6 孔板(其他的也可以,但感觉6孔比较好,大小适中)、marker笔直尺、20微升枪头(灭菌)、无血清培←养基、PBS

                步骤:所有能灭菌的器械都要灭菌,直尺和marker笔在操作前紫外照射30min(超净台内)

                1.先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀得划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。

                2.在空中加入约5X105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满。

                3.第二√天用枪头比着直尺,尽量垂至于背后的横线划痕,枪头要垂★直,不能倾斜。

                4.用PBS洗细胞3次,去处划下的细胞,加入无血清培养基。

                5.放入37度5%co2培养箱,培养。按0,6,12,24小时取样,拍照。

                细胞划痕注意事项:

                一般做划痕实验,都是在无血清或者底血清状态下培养的,否则细胞增殖就不能忽略。

                按照6孔板背后画线的垂直方向划痕,可以形成若干交叉点,作为固定的检测点,这就解决了前后观察时位置不固定的问题。



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