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                科技服务 > 分子机制研究服务 > 外泌体microRNA定量PCR 实验

                外泌体microRNA定量PCR 实验

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                 外泌体microRNA定量PCR 实验 
                    外泌体(Exosome)是由细胞分泌而来的微小囊泡,直径约为30-100 nm,具有杯状形态、双层膜结构,天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和细胞培养基等生物体液中。包括肿瘤细胞在内几乎所有类型ㄨ的细胞(免疫细胞、神经细胞、干细胞),都可以产生并释放exosome。Exosome可通过细胞膜受体直接激活受体细胞,也可运输蛋白质、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA,甚至细胞器进入受体细胞,参与细胞间通讯。Exosome在免疫应答、炎症反应、血管生成、凋亡、凝血和废物处理等生理过程∮发挥关键作用,可作为多种疾病的早期诊断标记物,也能作为靶向药█物的载体进行疾病治疗。
                    miRNA是一类22nt左右大小的非编码分子, 它可以通过外泌ㄨ体从一个地方转运到另外一个地方行使基因沉默功能。通过检测外泌体中miRNA表达变化,可以发现外泌体中miRNA特异性功能。






                 
                     

                  图1外泌体产生过程的示意图

                   图2外泌体miRN PCR扩增曲线            图3外泌体miRN PCR溶解曲线
                 
                 实验流程:
                 



                  
                 



                样品要求
                血清样品:2-4ml
                外泌体样品▼:1ml
                RNA样品:500ng

                参考文献
                Tkach M, et al. Communication by Extracellular Vesicles: Where We Are and Where We Need to Go. Cell. 2016 Mar 10;164(6):1226-32
                Enderle D, Spiel A, Coticchia CM, Berghoff E, Mueller R, Schlumpberger M, et al.Characterization of RNA from Exosomes and Other Extracellular Vesicles Isolated by a Novel Spin Column-Based Method. PLoS ONE(2015)10(8): e0136133. doi:10.1371/journal.pone.0136133
                Zhou W, Fong M Y, Min Y, et al. Cancer-Secreted miR-105 Destroys Vascular Endothelial Barriers to Promote Metastasis[J]. Cancer cell. 2014, 25(4): 501-515.
                Takahashi KJ, Yan IK, Wood J, et al. Involvement of Extracellular Vesicle Long Noncoding RNA (linc-VLDLR) in Tumor Cell Responses to Chemotherapy. Mol Cancer Res.2014 ,12(10): 1377–87.
                Li Y, Zheng QP, Bao CY, et al. Circular RNA is enriched and stable in exosomes: a promising biomarker for cancer diagnosis. Cell Res. 2015, 25(8):981-4.
                Melo SA, Sugimoto H, O'Connell JT, et al. Cancer Exosomes Perform Cell-Independent MicroRNA Biogenesis and Promote Tumorigenesis. Cancer Cell, 2014.

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