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                科技服务 > 分子机制研究服务 > 荧光定量PCR冰点促销

                荧光定量PCR冰点促销

                荧光定量PCR冰点促销
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                          荧光定量PCR检测

                实时荧光定量PCR技术即是在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号实▽时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR避免了传统PCR以终产物检测定量产生的偏差,提高实验的重复▅性。该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化、比较不同▲组织的mRNA表达差异、验证基因芯片和siRNA干扰的实验结果。 

                英拜为您提供的实时荧光定量PCR技术服务,全部实验皆使用进口试剂完成;主要实验步骤如下:


                1. 设∮计并合成Realtime PCR引物。

                2. 引物〗溶解后使用Promega的TaqDNA聚合酶进行含SG(SYBR? Green)的PCR反应的优化。

                3. 客户样品RNA抽提

                4. RNA质量检测
                   a. 紫外吸收测定法测定RNA在分光光度计260nm和280nm处的ぷ吸收值,以计算其↑浓度并评估RNA纯度。
                   b. 使用甲醛电泳试剂(ambion)进行变性琼♂脂糖凝胶电泳∩,检测RNA纯度及完整性。

                5. 按照逆转录酶(Invitrogen或Promega)使用说明将样品RNA逆转录为cDNA。

                6. 制备标准曲线样↑品:进行相对定量,需要先将︻样品的目的基因以及管家基因进行PCR扩增,其产物进行梯度稀释用于做标准曲线。

                7. 标准曲线样品和待测样品分别加入到含SG的RealTime PCR反应液中(其中TaqBeadTM 热启动聚合酶来自Promega公司),进行RealTime PCR扩增和检▃测。

                8. 检测结□果进行标准曲线分析,以对待测样品的目的基因进行定量。相对定量实验需要进一步用样ㄨ品的目的基因测得值除以管家基因测得值以校正误◣差,所得结果代表某样品的目的基因相对含量。

                9. 提供实验报告,包括详细的实验方法及实时荧光定量PCR实验结果及相关图表。

                 

                上海英拜生物科技有限公司
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                专业提供分子生物学技术服务:
                高通量测序:人全基因组重测序、外显子测〗序、宏基因组测序、RNA-seq、miRNA-seq、lncRNA-seq、单细胞测△序、CHIP-seq;
                DNA水平:SNP检测、甲基化检测、CHIP;
                RNA水平:、功能分类 PCR芯片、表达谱▂基因芯片、实时荧光定量PCR、原位杂交;
                蛋白水平:WB、抗体芯片、免疫组化、免疫荧光;报告基因实验
                细胞实验:细胞培养及转染、干扰及过表达、细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡、细胞迁移、细胞侵袭;
                生物信息学:芯片数据█分析、高通量测序分析、 个化分析方案;
                SCI协同服务:限量实验整体外包服务(IF1-10),SCI评估、润色、翻译、调整∮等服务。

                   



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