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                科技服务 > 细胞功能研究服务 > 流式检测细胞凋亡

                流式检测细胞凋亡

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                在现在的科研研究中,最初的研究基本上就是高通量筛选对照组和实验组的差异表达基因,然后进行大样♂本的荧光定量PCR验证,确定差异基因与某种疾病的相关性。在之后的●研究中,我们就要针对差异基因进行干扰或过表达来进行细胞功能实验。其中通〒过流式细胞进行细胞凋亡的检测是比较重要的方法。
                一、服务介绍

                流式细胞术(FlowCytometry,FCM):

                   

                流式细胞术(FlowCytometry,FCM):

                   就是对在高速流动的鞘液包裹下的细胞、粒子进行分析和分选的技术,这种细胞或粒子是经过特异荧光标记的。其特点是测量速度快,每秒钟能测数千个乃至上万个细胞,且可进行多参数测量,另一特点是在分析的同时可把具有指定特征的细胞分离出来,这就是分选╱技术。

                   重要参数:前向角散射∞(FSC):前向角散射光的强度与细胞的大小有关,也就是说,同一个细胞群体,FSC强的,其细胞大一些,而FSC弱的,其细胞小Ψ一些。侧向角散射↓(SSC):侧向角散射又称90°散射或大角散射。侧向角散射光对细胞∩膜、胞质、核膜的折射率更为敏感,对胞内较大的颗粒也会有反应。所以,侧向角散射光的强弱可反应细胞内精细结构和颗ζ粒的性质。荧光信号(FL):是细胞或细胞上的荧光染料被激光激发后发射→出的荧光,不同的荧光染料其发射波长不同。通过卐荧光强度可将同一个细胞群体中的有※荧光标记的细胞与无荧光标记的细胞区分开↙来,也就是我们通常所说的阳性细胞,也可以将阳性细胞⌒中的高FL的细胞与低FL的细胞区㊣ 分开来,也就是可以把强阳性细胞和弱阳性细胞区分开来。一般的流式细胞仪只装有一个激光光源(488nm),可测出三个FL,即FL1、FL2、FL3。FL2-W指①检测荧光的脉冲宽度,区分单个细胞和双联☉体细胞FL2-H指脉冲高度,细胞单位面积上的荧光浓度FL2-A指脉冲面∴积,即细胞荧光总和。

                二、服务流程

                1、细胞培养
                2、药物处理
                3、试剂处理
                4、测定吸光度
                5、撰写实验报告
                三、客户提供
                1、培养好的细胞(大于107)以及所需药品。
                2、药物作用方式☆(药物浓度、时间等)。
                四、交付内容
                实验报告:详细操作步骤、统计分析。

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